DNA Complementar

O DNA complementar é DNA sintetizado a partir de um molde de mRNA maduro (após terem sido removidos os intrões) numa reação catalisada por duas enzimas, a transcriptase reversa e a DNA polimerase.

Etapas do DNA Complementar

1º passo - selecionar mRNA que carrega a informação da proteína de interesse

2 º passo - utilizar a transcriptase reversa para produzir uma cadeia simples de cDNA

3º passo - através da DNA polimerase, formar a cadeia complementar de cDNA

4º passo - utilizar uma enzima de restrição no cDNA

5º passo - selecionar o vetor e utilizar a mesma enzima de restrição

6º passo - unir as extremidades coesivas do cDNA e do vetor através da DNA ligase

7º passo - inserir o vetor numa bactéria